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雙分子熒光互補（Bimo-lecular fluorescence complementation，簡稱BiFC）技術，可以直觀、快速地判斷目標蛋白在活細胞中的定位和相互作用。該技術巧妙地將熒光蛋白分割成兩個不具有熒光活性的分子片段（N-fragment、C-fragment），再將這兩個熒光蛋白的片段分別融合兩個目標蛋白A、B，如果A蛋白與B蛋白發生了相互作用，在空間上互相靠近，則兩個熒光蛋白的片段就會重新構建成完整的具有活性的熒光蛋白，在激發光的激發下，熒光蛋白發出熒光。反之，若A蛋白與B蛋白之間沒有發生相互作用，則不能被激發岀熒光。常用的熒光蛋白是綠色熒光蛋白GFP。